Descrição:
A ERp29 é uma proteína chaperona envolvida no processo de enovelamento e secreção de proteínas. O papel da ERp29 no desenvolvimento e na progressão tumoral é controverso e sua função em tumores de cabeça e pescoço (CP) ainda é desconhecida. Assim, os objetivos do presente estudo são os de avaliar o papel da ERp29 na modulação do ciclo celular, da apoptose, da proliferação celular, da migração celular e do estresse do retículo endoplasmático (RE); identificar genes e microRNAs associados com a expressão diferencial da ERp29 e identificar proteínas que interagem com a ERp29. A superexpressão e o silenciamento do gene ERP29 serão induzidos por meio de técnicas de clonagem em linhagens de células SCC-9, SCC-25, CAL-27 (tumores de língua) e FaDu (câncer de faringe), sensíveis e resistentes à cisplatina. As células modificadas serão submetidas aos ensaios de citometria de fluxo para detecção do ciclo celular e da apoptose. Os ensaios de proliferação e migração celular e do estresse do RE serão realizados por meio da técnica de contagem de células, da técnica de “wound healing” e tunicamicina, respectivamente. A identificação de genes e de microRNAs associados com a expressão diferencial do ERp29 será realizada por meio de ensaios com microarranjos. A identificação de proteínas que interagem com a ERp29 será realizada por meio de ensaios de co-imunoprecipitação. Os resultados das diferenças entre os grupos serão avaliados por meio do teste t ou Mann-Whitney. Ao término do estudo, esperamos identificar um possível alvo terapêutico para o tratamento de tumores de CP.